Amodau Sylfaenol ar gyfer Diwylliant Cell
1. cyfrwng diwylliant celloedd priodol
Cyfrwng meithrin celloedd addas yw un o'r amodau pwysicaf ar gyfer twf celloedd ac ymlediad in vitro. Mae'r cyfrwng diwylliant nid yn unig yn darparu maeth celloedd a sylweddau sylfaenol i hyrwyddo twf celloedd ac amlhau, ond hefyd yn darparu amgylchedd byw ar gyfer twf ac atgenhedlu celloedd diwylliedig.
2. Serwm o ansawdd uchel
Ar hyn o bryd, mae angen ychwanegu serwm ar y rhan fwyaf o gyfryngau synthetig. Serwm yw un o'r cydrannau pwysicaf mewn cyfrwng diwylliant celloedd, sy'n cynnwys amrywiaeth o ffactorau twf a maetholion eraill sydd eu hangen ar gyfer twf celloedd.
3. Tymheredd twf celloedd cyson
Er mwyn cynnal twf egnïol celloedd diwylliedig, rhaid cael tymheredd cyson a phriodol.
4. amgylchedd nwy addas
Nwy yw un o'r amodau angenrheidiol ar gyfer goroesiad celloedd mamalaidd, a'r nwyon gofynnol yn bennaf yw ocsigen a charbon deuocsid.
5. Tymheredd Diwylliant Cell
Er mwyn cynnal twf egnïol celloedd diwylliedig, rhaid cael tymheredd cyson ac addas. Mae gan wahanol fathau o gelloedd ofynion gwahanol ar gyfer tymheredd diwylliant. Y tymheredd safonol ar gyfer diwylliant celloedd dynol yw 36.5 gradd ± 0.5 gradd . Bydd gwyriad o'r ystod tymheredd hwn yn effeithio ar fetaboledd arferol celloedd a hyd yn oed yn marw.
6. Amgylchedd nwy addas
Nwy yw un o'r amodau angenrheidiol ar gyfer goroesiad diwylliant celloedd mamaliaid, a'r nwyon gofynnol yn bennaf yw ocsigen a charbon deuocsid. Mae ocsigen yn cymryd rhan yn y cylch asid tricarboxylic, gan gynhyrchu ynni ar gyfer twf celloedd ac amlhau a syntheseiddio'r gwahanol gydrannau sydd eu hangen ar gyfer twf celloedd.
Halogiad cyffredin o ddiwylliant celloedd
1. Halogiad bacteriol
Halogiad bacteriol yw'r mwyaf cyffredin. Unwaith y bydd y llawdriniaeth ychydig yn amhriodol, bydd yn achosi halogiad celloedd. Ar ôl halogiad bacteriol, bydd yn ymddangos fel stribedi tenau du o dywod pan gaiff ei arsylwi o dan y microsgop. Siâp gwialen, ac ati Yn ail, mae'r cyfrwng diwylliant yn troi'n felyn ac yn gymylog, a gellir gweld gwaddodion siâp tywod mân yn glir yn y ddysgl petri, ac mae arogl rhyfedd o bryd i'w gilydd.
2. Halogiad ffwngaidd
Mae'r datrysiad diwylliant wedi'i halogi gan ffwng yn glir ac yn dryloyw, nid fel achos mawr o haint bacteriol, felly mae'n anodd ei ganfod yn gynnar. Weithiau mae'n edrych fel ffilament o dan y microsgop, weithiau mae'n edrych fel cwrel, ac yn araf bydd ffilament du tenau iawn yn tyfu. Hyn Pan fydd hi'n rhy hwyr, mae'n anodd i'r celloedd gael eu hachub.
3. halogiad yr Wyddgrug
Yn gyson â heintiau ffwngaidd, oherwydd bod y cyfrwng diwylliant yn glir, mae halogiad ffwngaidd yn anodd ei ganfod yn gynnar, pan fydd yn aml yn rhy hwyr. Ymddangosodd amhureddau fflocculent yn araf yn y cyfrwng diwylliant, a gellid gweld gwrthrychau arnofiol màs ffilamentaidd o dan y microsgop, fel cathod yn y gwynt. Gall celloedd dyfu o hyd, ond dros amser, mae'r celloedd yn dirywio ac yn peidio â thyfu.
4. Haint mycoplasma
Mae'r cyfrwng diwylliant yn troi'n gymylog. Ar ôl i mycoplasma heintio'r celloedd, nid yw'r newidiadau cytopathig yn amlwg, ond mae cyflwr y gell yn gwaethygu ac mae'r twf yn arafu. Efallai y bydd smotiau du bach o dan y microsgop, ond yn gyffredinol nid yw'r cyfrwng diwylliant yn gymylog. Ar ôl i'r celloedd gael eu tramwyo, ymddangosodd smotiau du rhynggellog, gwagiwyd celloedd, ac roedd llawer o gelloedd yn debyg i apoptosis a necrosis. Yn y pen draw, arnofio y celloedd a marw yn gyfan gwbl.
Atal halogiad celloedd
Gall sefydlu rheolau a rheoliadau da helpu i leihau halogiad celloedd. Gan gynnwys system mynediad, normau gweithredu a system rheoli dyddiol.
System mynediad: gan gynnwys personél a deunyddiau. Mae angen hyfforddi personél cyn y gallant weithredu ar eu pen eu hunain, a rhaid iddynt fodloni'r gofynion gwisgo cyn mynd i mewn i'r labordy, megis cotiau gwyn, gynau ynysu, masgiau, menig, ac ati. Ar gyfer yr eitemau sydd eu hangen, dylai eitemau na ellir eu taflu fod yn llym wedi'i sterileiddio a'i sterileiddio, ac mae angen prynu eitemau a brynwyd o sianeli rheolaidd a dibynadwy. Dylid profi a gwirio celloedd sydd newydd eu prynu cyn eu defnyddio.
Manylebau gweithredu: Mae'n well llunio manylebau ar gyfer gweithrediadau arferol, a rhaid i bersonél labordy ddilyn y manylebau gweithredu, na ellir eu newid yn ôl ewyllys, a hefyd feithrin arferion gweithredu da ar gyfer personél labordy. Er enghraifft, ar ôl i'r tip pibed gael ei sugno, ni chaiff ei ymestyn i'r cyfrwng am yr eildro, a bydd swm digonol o gyfrwng yn cael ei sugno unwaith. Wrth ychwanegu hylif, dylid ychwanegu'r hylif mewn ataliad gymaint â phosibl, a all atal halogiad mycoplasma a chroeshalogi celloedd yn effeithiol. Yn ogystal, os yn bosibl, dim ond gweithredu un llinell gell ar y tro, ac mae'n well cael ychydig o egwyl amser rhwng celloedd er mwyn osgoi croeshalogi.
System reoli ddyddiol: Mae'n cynnwys rheolau a dulliau ar gyfer defnyddio, glanhau a chynnal a chadw'r amgylchedd a nwyddau traul, adweithyddion, ac ati Mae yna hefyd reolaeth ar y defnydd, rhestr eiddo a chaffael adweithyddion a nwyddau traul, gan gynnwys rheoli rhestr eiddo dwy lefel o samplau cell. Ar gyfer y ffynonellau halogiad nad ydynt yn hawdd eu darganfod, mae'n well cynnal profion rheolaidd, yn bennaf halogiad mycoplasma a chroeshalogi celloedd.
Mae BKMAM Bio yn darparu nwyddau traul cyfatebol ar gyfer meithriniad celloedd:
Seigiau petri crwn/sgwâr plastig tafladwy:
Deunydd polystyren tryloywder uchel (PS);
Mae'r wyneb yn llyfn ac yn wastad, ac nid oes unrhyw ystumiad optegol o gelloedd o dan arsylwi microsgop;
Mae dyluniad pentyrru yn gwneud pentyrru a storio yn haws;
Sterileiddio ethylene ocsid (EO);
Gwisgo a gwrthsefyll cyrydiad.
Triniaeth gyson o seigiau meithriniad celloedd:
Deunydd polystyren (PS);
Sterileiddio pelydr electron, dim pyrogen, dim tocsin;
Triniaeth wyneb plasma gwactod, adlyniad celloedd rhagorol;
Mae'r wyneb yn llyfn ac yn wastad, ac nid oes unrhyw ystumiad optegol o gelloedd o dan arsylwi microsgop;
Mae dyluniad y gellir ei bentyrru yn ei gwneud hi'n haws pentyrru a storio.
Platiau diwylliant celloedd plastig:
Deunydd polystyren (PS);
Yn addas ar gyfer diwylliant celloedd arferol, math plât triniaeth nad yw'n glynu;
Dim pyrogen, dim tocsin, wedi'i sterileiddio;
Deunydd pacio annibynnol math rhwyg hawdd, hawdd i'w gweithredu;
Triniaeth lynol o blatiau meithrin celloedd:
Deunydd polystyren (PS);
Triniaeth adlynol (triniaeth TC) math o blât, sy'n addas ar gyfer diwylliant celloedd ymlynol;
Dim pyrogen, dim tocsin, wedi'i sterileiddio;
Deunydd pacio annibynnol math rhwyg hawdd, hawdd i'w gweithredu;
Mae pob un yn waelod gwastad.
Trin fflasgiau meithriniad celloedd yn gyson:
Deunydd polystyren (PS);
Sterileiddio pelydr electron, dim pyrogen, dim tocsin;
Triniaeth wyneb plasma gwactod, adlyniad celloedd rhagorol;
Gorchudd anadlu, sy'n ffafriol i gyfnewid nwy ac yn atal micro-organebau rhag pasio drwodd.
Cryofialau sbin mewnol/allanol:
100 y cant deunydd polypropylen pur (PP);
Yn gallu gwrthsefyll sterileiddio 15psi, 121 gradd;
Mae wal y tiwb wedi'i dewychu, ac mae gan gorff y tiwb raddfa ac ardal ysgrifennu;
Mae sêl cylch silicon rhwng yr edau gorchudd pibell a'r corff pibell i sicrhau tyndra;
Dim DNase, dim RNase, dim pyrogen, dim endotocsin.
